Efecto de la adición de antioxidantes en los diluyentes para la preservación de semen ovino / Effect of adding antioxidants in diluents for the preservation of sheep semen / Efeito da adição de antioxidantes nos diluentes para preservação de sêmen ovino

Resumen El objetivo del presente estudio fue evaluar el efecto sobre la calidad espermática de tres substancias antioxidantes (50 µM de trolox/108 espermatozoides, 50 µg de catalasa/ml de eyaculado y cisteamina 5mM) en una base de diluyente comercial Triladyl™, bajo condiciones de refrigeración y congelación/descongelación en semen ovino. Se congeló semen de seis machos adultos en una base del diluyente comercial Triladyl™. El eyaculado de cada macho fue puesto en cuatro diferentes alícuotas: una para control, y a las demás se les adicionó con la base del diluyente 50 µM de trolox/108 espermatozoides, 50 µg de catalasa/ml de eyaculado y cisteamina 5 mM. La calidad espermática precongelación (5 °C) y poscongelación se evaluó con la ayuda de un sistema de análisis computarizado (IVOS II®), con lo cual se eliminó la subjetividad a la prueba. Se observó que 50 µM de trolox/108 SPZ y 50 µg de catalasa/ml tienen la capacidad de mantener valores (p < 0,05) superiores de motilidad total (64,26 ± 0,82 y 55,54 ± 0,85) y motilidad progresiva (47,26 ± 0,75 y 44,32 ± 1,13) en condiciones de precongelación, y para motilidad total (67,60 ± 1,91 y 63,47 ± 3,40), motilidad progresiva (50,87 ± 2,58 y 38,88 ± 2,31) y viabilidad (66,97 ± 2,25 y 61,16 ± 4,31) en poscongelación, comparados con los tratamientos control o la adición de 5 mM de cisteamina. La adición de 50 µM de trolox/108 espermatozoides y de 50 µg de catalasa/ml de semen mejora la motilidad total y progresiva del semen ovino refrigerado a 5 °C y la viabilidad en semen congelado/descongelado.

Abstract The present study aimed to evaluate the effect on sperm quality of three antioxidant substances (50 μM of trolox/108 spermatozoa, 50 μg of catalase/ml of ejaculate, and 5mM cysteamine) in a Triladyl™ commercial diluent base, under conditions of refrigeration and freezing/thawing in sheep semen. Semen from six adult males was frozen in a commercial Triladyl™ diluent base. The ejaculate of each male was placed in four different aliquots: one for control, and the other three with additional 50 μM of trolox/108 spermatozoa, 50 μg of catalase/ml of ejaculate, and 5 mM cysteamine, respectively, in the diluent base. Pre-freezing (5 °C) and post-freezing sperm quality was evaluated using a computerized analysis system (IVOS II®), which eliminated subjectivity during the test. It was observed that 50 μM of trolox/108 SPZ and 50 μg of catalase/ml are able to maintain higher values (p < 0.05) of total motility (64.26 ± 0.82 and 55.54 ± 0.85 ) and progressive motility (47.26 ± 0.75 and 44.32 ± 1.13) under pre-freezing conditions, and of total motility (67.60 ± 1.91 and 63.47 ± 3.40), progressive motility (50.87 ± 2.58 and 38.88 ± 2.31), and viability (66.97 ± 2.25 and 61.16 ± 4.31) in the post-freezing period, compared to control treatments or the addition of 5 mM of cysteamine. The addition of 50 μM of trolox/108 spermatozoa and 50 μg of catalase/ml of semen improves the total and progressive motility in ovine semen refrigerated at 5 °C, as well as viability in frozen/thawed semen.

Resumo O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito sobre a qualidade espermática de três substancias antioxidantes (50 µM de trolox/108 espermatozoides, 50 µg de catalasa/ml de ejaculado e cisteamina 5mM) numa base de diluente comercial Triladyl™, sob condições de refrigeração e congelamento/descongelamento em sêmen ovino. Sêmen de seis machos adultos foi congelado numa base do diluente comercial Triladyl™. O ejaculado de cada macho foi posto em quatro diferentes alíquotas: uma para controlo e nas outras foi adicionada a base do diluente 50 µM de trolox/108 espermatozoides, 50µg de catalasa/ml de ejaculado e cisteamina 5mM. A qualidade espermática precongelação (5 °C) e pós-congelação avaliou-se com ajuda de um sistema de análise computadorizado (IVOS II®), eliminando assim a subjetividade ao teste. Observou-se que 50 µM de trolox/108 SPZ e 50 µg de catalasa/ml têm a capacidade de manter valores (p < 0,05) superiores de motilidade total (64,26 ± 0,82 e 55,54 ± 0,85) e motilidade progressiva (47,26 ± 0,75 e 44,32 ± 1,13) em condições de pre-congelação, e para motilidade total (67,60 ± 1,91 y 63,47 ± 3,40), motilidade progressiva (50,87 ± 2,58 e 38,88 ± 2,31) e viabilidade (66,97 ± 2,25 e 61,16 ± 4,31) em pós-congelação, comparados com os tratamentos controle ou a adição< de 5 mM de cisteamina. A adição de 50 µM de trolox/108 espermatozoides e 50 µg de catalasa/ml de sêmen melhora a motilidade total e progressiva do sêmen ovino refrigerado a 5 °C e a viabilidade em sêmen congelado/descongelado.

Fragmentación del ADN espermático e infertilidad masculina / Fragmentation of sperm DNA and male infertility

La integridad del ADN de los espermatozoides, es un indicador importante de la fertilidad, se utiliza como una variable adicional para evaluar, junto al espermograma, la calidad de una muestra seminal. En el presente trabajo se describen algunos aspectos de interés relacionados con la fragmentación del ADN espermático, cuya etiología es multifactorial y está relacionada con factores intrínsicos, como el empaquetamiento anormal de la cromatina durante la espermiogénesis, la apoptosis defectuosa antes de la eyaculación y la producción excesiva de especies reactivas del oxígeno; y con factores extrínsecos, como son los cambios en los hábitos de vida, la exposición a agentes tóxicos, así como la edad avanzada. La fragmentación está asociada al deterioro de las variables seminales, además afecta la fertilidad natural y la realizada por tratamientos de reproducción asistida, por lo que la implementación en los laboratorios de Andrología, de la tecnología para detectar si el ADN de los espermatozoides está íntegro o fragmentado, incorpora un nuevo conocimiento en el estudio de los hombres con trastornos de fertilidad, lo que contribuye a mejorar el diagnóstico y pronóstico de la infertilidad masculina. Para realizar este trabajo se revisaron 122 artículos, de los cuales 84 cumplieron con los criterios de calidad esperados. La búsqueda se realizó a través de los buscadores habituales(AU)

Sperm DNA´s integrity is an important indicator of fertility and it is used as an additional variable to evaluate the quality of a seminal sample, together with the spermogram. This paper describes some interesting aspects related to the fragmentation of sperm DNA, whose etiology is multifactorial and is related to intrinsic factors, such as the abnormal packing of chromatin during spermiogenesis, defective apoptosis before ejaculation, and the excessive production of oxygen´s reactive species; and with extrinsic factors, such as changes in life habits, exposure to toxic agents, as well as aging. Fragmentation is associated with the deterioration of seminal variables, it also affects natural fertility and that produced by assisted reproduction treatments, so the implementation in the andrology laboratories of the technology to detect if the DNA of the sperm is intact or fragmented incorporates a new knowledge in the study of men with fertility disorders, which contributes to improve the diagnosis and prognosis of male infertility. To carry out this work, 122 articles were reviewed, of which 84 met the expected quality criteria. The search was made through the usual search engines(AU)

Leucocitos seminales y calidad espermática de hombres en estudio de infertilidad / Seminal leukocytes and sperm quality in men involved in infertility study

Introducción: los leucocitos en exceso en el semen humano pueden estar asociados a la disminución de la calidad espermática. La elevada incidencia de leucocitos en el semen de hombres que acuden a nuestro servicio, pudiera estar vinculada al deterioro de las variables de calidad espermática, y vincularse con problemas de infertilidad masculina. Objetivo: determinar la frecuencia de leucocitospermia en el semen de hombres que consultan por infertilidad, e identificar si existe asociación entre la presencia de leucocitospermia y alteraciones en las variables de calidad del semen. Métodos: se realizó un estudio descriptivo transversal, en el cual se incluyeron 136 hombres, con edades entre 20 y 45 años, que acudieron al examen de calidad del semen, procedentes de las consultas de atención a parejas en estudio de infertilidad, del Instituto Nacional de Endocrinología, en La Habana, y que no refirieron síntomas de infección genitourinaria clínicamente activa, ni causas demostrables que afectaran la calidad seminal. El análisis del semen, para determinar las variables seminales, se realizó siguiendo los lineamientos de la OMS, incluyendo la técnica de peroxidasa para determinar la concentración de leucocitos seminales. Se consideraron los aspectos éticos en la investigación y los resultados se analizaron mediante la aplicación de la prueba de chi cuadrado. Un valor de p< 0,05 se consideró estadísticamente significativo. Resultados: de las 136 muestras de semen evaluadas, se encontraron leucocitospermia en 31 (22,7 por ciento). Todos los indicadores de calidad seminal fueron menores en presencia de leucocitospermia, aunque solo se obtuvo una diferencia significativa en relación con la concentración espermática (p< 0,05). Conclusiones: la frecuencia de leucocitospermia en la muestra estudiada es prevalente y asociada con un deterioro estadísticamente significativo de la concentración espermática(AU)

Introduction: excessive amount of leukocytes in the human semen can be related to lower sperm quality. The high incidence of leukocytes in semen from males who went to our service could be linked to deterioration of the sperm quality variables and to male infertility problems. Objective: to determine the frequency of leukocytospermia in the semen of men who visited our infertility service and to identify the possible association between the leukocytospermia and altered quality variables of semen. Methods: a cross-sectional and descriptive study of 136 men aged 20 to 45 years, who were performed the semen quality exam and came from the service provided to couples under infertility study in the National Institute of Endocrinology in Havana. These men had not stated any symptom of clinically active urogenital infection and no proven causes that might affect the semen quality. The semen analysis to determine the seminal variables complied with the WHO guidelines including the peroxidase technique to estimate the seminal leukocyte concentrations. The ethical aspects of research were respected whereas the Chi-square test served to analyze the results; the p< 0.05 was considered as statistically significant. Results: of 136 evaluated semen samples, leukocytospermia was found in 31 (22.7 percent). All the seminal quality indicators were lower in leukocytospermia, although the significant difference was only found in the sperm concentration (p< 0.05). Conclusions: the frequency of leukocytospermia in the studied sample is prevalent and associated to statistically significant deterioration of the sperm concentration(AU)

Efecto de Maytenus macrocarpa “Chuchuhuasi” en el sistema reproductor masculino del ratón (Mus musculus)

Maytenus macrocarpa (Chuchuhuasi) es un árbol nativo de la región Amazónica del Perú utilizado como planta medicinal para el tratamiento de muchas enfermedades, sin embargo su efecto sobre el sistema reproductor masculino aún no ha sido elucidado. El objetivo del presente estudio fue evaluar el efecto del extracto acuoso de M. macrocarpa en dosis diarias durante 7 días sobre los parámetros reproductivos de ratones machos. Se utilizó machos maduros de la cepa C57BL divididos en 2 grupos (n=10), Grupo Control (C): NaCl 0.9% y Grupo Tratamiento (T): Extracto acuoso de Chuchuhuasi, ambos suministrado diariamente vía sonda esofágica y al octavo día fueron eutanizados. Se registraron el peso corporal y de los órganos reproductivos: testículo, epidídimo y conducto deferente, se evaluaron la concentración, movilidad y morfología espermática. En nuestros datos observamos diferencias significativas (Prueba t- Student P=0.05) en el peso de la cabeza y cuerpo del epidídimo (C: 19.25±1.1 vs T: 21.26±2.0), el peso del conducto deferente (C: 10.62±0.7 vs T: 11.75±0.5), movilidad espermática progresiva (C: 42.16±5.2 vs T: 25.82±8.4) e Inmóviles (C: 36.05±4.9 vs T: 48.51±7.2). No se observaron diferencias en el recuento espermático entre ambos grupos. La morfología espermática normal disminuyó con la ingesta de M. macrocarpa (Prueba t-Student p<0.05) (C: 39.72±1.3 vs T: 30.78±4.9). Concluimos que el extracto acuoso de M. macrocarpa presenta un efecto negativo en el sistema reproductivo masculino de ratones.

Maytenus macrocarpa (chuchuhuasi) is native tree of the Peruvian Amazon used as traditional medicine for the treatment of many diseases, but its effect on the male reproductive system has not yet been elucidated. The aim of this study is evaluate the effect of aqueous extract of M. macrocarpa in daily doses for 7 days on reproductive parameters of male mice. We used C57BL mature male mice divided into 2 groups (n= 10), Control Group (C): 0.9% NaCl and Treatment group (T): Aqueous extract of Chuchuhuasi, both supplied daily via oral gavages. At the eight day of treatment the mice were euthanized. The weight of the body and reproductive organs: testis, epididymis and vas deferens, were registered. Concentration, motility and sperm morphology were evaluated. The results showed significantly differences (t- Student test P<0.05) in the weight of the head and body epididymis (C: 19.25±1.1 vs T: 21.26±2.0), vas deferens (C: 10.61±0.7 vs T: 11.75±0.5), progressive sperm motility (C: 42.16±5.2 vs T: 25.82±8.4) and immobile sperm (C: 36.05±4.9 vs T: 48.51±7.2). No difference in sperm count was observed. The sperm normal morphology diminished with ingest of M. macrocarpa (t-Student test p <0.05) (C: 39.72±1.3 vs T: 30.78±4.9). We conclude that the aqueous extract of chuchuhuasi, has a negative effect on the male reproductive system of mice.

Micoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum y bacterias aeróbicas en el semen de hombres que consultan por infertilidad / Micoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum and aerobic bacteria present in the semen from men attending infertility service

Introducción: las infecciones en el semen humano pueden alterar la calidad espermática, y vincularse con problemas de infertilidad masculina. Objetivo: determinar la frecuencia de infecciones por Micoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum y bacterias aeróbicas en el semen de hombres que consultan por infertilidad, e identificar si existe relación entre las infecciones encontradas y las alteraciones en las variables de calidad del semen. Métodos: se realizó un estudio descriptivo transversal, para evaluar muestras de semen de 140 hombres, con edades entre 20 y 45 años, provenientes de las consultas de infertilidad del Instituto Nacional de Endocrinología. Se realizó un espermograma completo, que incluyó leucocitospermia, siguiendo los lineamientos de la OMS, para determinar las variables cualitativas y cuantitativas del semen. Las muestras de semen fueron cultivadas en agar sangre y agar chocolate a 37° C en atmósfera de CO2 para investigar bacterias aeróbicas, y se utilizó un juego de reactivos (Mycoplasma System Plus) que permite realizar el cultivo, la identificación, el conteo semicuantitativo y el antibiograma de micoplasmas/ureaplasma urogenitales. Se tuvo en cuenta los aspectos éticos, y los resultados obtenidos se analizaron mediante cálculo de por cientos y la aplicación de la prueba de chi cuadrado. Resultados: de las 140 muestras de semen evaluadas, 58 (41,4 por ciento) mostraron la presencia de infecciones, de ellas 37 correspondieron a Ureaplasma urealyticum (25,7 por ciento), 2 a Micoplasma hominis (1,4 por ciento) y 19 a bacterias aeróbicas (13,8 por ciento ). Al comparar las variables cualitativas y cuantitativas del semen con los sujetos infectados y no infectados, no se observaron diferencias estadísticamente significativas en ninguna de las variables de calidad espermática evaluadas. Conclusiones: la frecuencia total de infecciones, en la muestra estudiada, fue relativamente alta, pero no asociada a alteraciones en las variables seminales(AU)

Introduction: human semen infections can alter the sperm quality and be associated to male infertility disorders. Objectives: to determine the frequency of infections from Micoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum and other aerobic bacteria in the semen of men who attended the infertility service, and to identify whether there is some relation between the detected infections and the altered semen quality variables or not. Methods: a cross-sectional descriptive study was performed to evaluate semen samples from 140 men aged 20 to 45 years, who attended the infertility service at the National Institute of Endocrinology. According to the WHO guidelines, a complete spermiogram including leukocytospermia was performed in order to determine the qualitative and quantitative variables in the semen. The semen samples were cultured in blood agar and in chocolate agar at 37oC under CO2 environment to find out possible aerobic bacteria. To this end, a set of reagents known as Mycoplasma System Plus was used, allowing the culture, the identification, the semi-quantitative count and the antibiogram of urogenital mycoplasms/ureaplasms. The ethical aspects were allowed for; the results were analyzed through percentage estimations and the chi square test. Results: out of the 140 evaluated semen samples, 58 (41.4 percent) showed some infection, 37 of them were caused by Ureaplasma urealyticum (25.7 percent), 2 by Micoplasma hominis (1.4 percent) and 19 by the aerobic bacteria (13.8 percent). When making a comparison of the qualitative and quantitative variables of the semen from infected and non-infected subjects, there were not any statistically significant differences in the evaluated variables of the sperm quality. Conclusions: the total frequency of infections in the studied sample was relatively high, but was not associated to altered seminal variables(AU)

Rat spermatogenesis damage in intermittent hypobaric hypoxia and the protective role of melatonin: I cauda epididymal spermatozoa / Daño en la espermatogénesis de rata en hipoxia hipobárica intermitente y el papel protector de la melatonina: I espermatozoides de la cauda epididimaria

At present it is not clear if male fertility is affected by intermittent hypobaric hypoxia (IHH). This is an important issue since a large human population works over 3000 masl. This study analyzes epididymal sperm, in adult Sprague Dawley rats after five cycles of IHH (7 days exposure to 4200 masl in a hypobaric chamber / 7 days at 500 masl). The animals were separated into groups of 8, one group was exposed to hypoxia (7 days), and the others to IHH for one to five cycles. Controls (500 masl) were examined at the beginning and at the end of the 70 experimental days. A duplicate set of rats treated with melatonin (supposedly protecting from hypoxia) was also examined, as were their controls, injected with 0,03 percent ethanol (melatonin solvent). Epididymal sperm parameters, were evaluated. Damage caused by IHH increases with time. Sperm counts drop, while sperm chromatin swelling, DNA instability (metachromasia with acridine orange epifluorescence) and comet (+) tests increase. Melatonin counteracts all this damage, possibly due to its high efficiency as a reactive oxygen species scavenger. In conclusion, IHH exposure damages sperm quality and therefore male reproductive function.

En la actualidad no está claro si la fertilidad masculina se ve afectada por la hipoxia hipobárica intermitente (HHI). Esta es una cuestión importante, ya que una gran población humana trabaja a más de 3000 metros sobre el nivel del mar (msnm). Este estudio analiza los espermatozoides del epidídimo, en ratas Sprague Dawley adultas, después de cinco ciclos de HHI (7 días de exposición a 4200 msnm en una cámara hipobárica / 7 días a 500 msnm). Los animales fueron separados en grupos de 8, un grupo fue expuesto a la hipoxia (7 días), y los otros a HHI de uno a cinco ciclos. Los controles (500 msnm) se examinaron al comienzo y al final de los 70 días de experimentación. Un grupo duplicado de ratas tratadas con melatonina (supuestamente protegiendo de la hipoxia) también fue examinado, al igual que los controles, inyectados con 0,03 por ciento de etanol (solvente de melatonina). Los parámetros espermáticos del epidídimo fueron evaluados. Los daños causados por la HHI aumentaron con el tiempo. Se evaluó el conteo espermático en gota, mientras la cromatina espermática esta hinchada, la inestabilidad del ADN (metacromasia epifluorescente con naranjo de acridina) y la prueba de aumento (+) de cometas. La melatonina neutralizó todo el daño, posiblemente debido a su alta eficacia como un eliminador de especies reactivas de oxígeno. En conclusión, la exposición a HHI daña la calidad espermática y por lo tanto la función reproductora masculina.

Actividad de glutatión peroxidasa y superóxido dismutasa en sangre, plasma sanguíneo y plasma seminal en toros Normando / Atividade de superóxido dismutase e glutationa peroxidase no sangue, plasma e plasma seminal em touros normando / Activity of glutathione peroxydase and superoxide dismutase in whole blood, blood plasma and seminal plasma in normande bulls

Con el objeto de evaluar la actividad de las enzimas antioxidantes glutatión peroxidasa (GPx; EC 1.11.1.9), y superóxido dismutasa (SOD; EC 1.15.1.1) en sangre, plasma y plasma seminal y su relación con las características seminales: volumen, movilidad individual y en masa, concentración, relación vivos y muertos y prueba hiposmótica (PH), se tomaron muestras de sangre y semen en 20 toros Normando en la cordillera central del Departamento de Caldas (Colombia). De cada toro se tomó una muestra de semen mediante electroeyaculador y una muestra de sangre de la vena coccígea media. Los datos fueron analizados mediante un modelo lineal. La actividad sanguínea de GPx fue 80 ± 48 U/g Hb, 0.09 ± 0.1 U/ml y 0.9 ± 0.7 U/ml en sangre, en plasma sanguíneo y plasma seminal, respectivamente, sin tener correlación con las características seminales ni con la PH (p>0.05). La actividad de SOD fue 940 ± 374 U/g Hb, 120 ± 73 U/ml, y 5.1 ± 2.6 U/ml, en sangre, plasma sanguíneo y en plasma seminal, respectivamente. Una tendencia a una correlación negativa entre SOD en plasma seminal y la PH (p = 0.06) fue hallada, sin tener correlación con las características seminales (p>0.05). La actividad de ambas enzimas en sangre sugiere un subconsumo de Se, Cu y Zn. La actividad enzimática en sangre y plasma no se vio reflejada en la capacidad de defensa enzimática antioxidante del plasma seminal, lo que sugiere la presencia de isoenzimas no determinadas o compartimientos independientes entre los plasmas sanguíneo y seminal.

The aim of the study was to evaluate the activity of the antioxidant enzymes glutathione peroxidase (GPx; EC 1.11.1.9), and superoxide dismutase (SOD; EC 1.15.1.1) in blood, blood plasma and seminal plasma, and to correlate them with seminal characteristics (i.e. volume, individual and total motility, concentration, ratio of live and death cells, and hyposmotic test) in Normande bulls. Semen and blood samples were collected from each bull (n = 20) from farms located in the high Andes mountains in Caldas State (Colombia). Data were analyzed by a linear regression model. The blood activity of GPx was 80 ± 48 U/g Hb, 0.09 ± 0.1 U/ml, and 0.9 ± 0.7 U/ml, in blood, blood plasma and seminal plasma, respectively. There was no relationship to either seminal characteristics or hyposmotic test (p>0.05). The activity of SOD was 940 ± 374 U/g Hb, 120 ± 73 U/ml, and 5.1 ± 2.6 U/ml, in blood, blood plasma, and seminal plasma, respectively. There was a negative trend (p = 0.06) in the relationship of SOD activity in seminal plasma to hyposmotic test; however, there was no association to other seminal characteristics (p>0.05). The blood activity of both enzymes suggested a suboptimal intake of Se, Cu, and Zn, and it was not translated into an adequate antioxidant defense of the seminal plasma. It suggested the activity of undetermined isoenzymes or and independency between blood and testicle compartments.

Com o objetivo de avaliar a atividade de enzimas antioxidantes glutationa peroxidase (GPx; EC 1.11.1.9), e superóxido dismutase (SOD; EC 1.15.1.1) sangue e plasma seminal plasma, e sua relação com as seguintes características seminais: volume, massa e de mobilidade individual, a concentração, relação vivos e mortos ela prova hiposmótica (PH), amostras de sangue e de sêmen de 20 touros Normando na cordilheira central do Estado de Caldas (Colombia) foram tomadas. Em cada touro teve uma amostra de sêmen através electroeyaculador e uma amostra de sangue da veia coccígea média. Os dados foram analisados usando um modelo linear. A atividade de GPx foi 80 ± 48 U/g Hb, 0.09 ± 0.1 U/ml e 0.9 ± 0.7 U/ml, na sangue, no plasma sanguíneo e plasma seminal, respectivamente, sem qualquer correlação com as características seminais ou com a pH (p>0.05). A atividade da SOD foi 940 ± 374 U/g Hb, 120 ± 73 U/ml, y 5.1 ± 2.6 U/ml, no sangue, no plasma sanguíneo e plasma seminal, respectivamente. Uma tendência para uma correlação negativa entre SOD no plasma seminal e PH (p = 0.06) foi encontrada, sem correlação com as características seminais (p>0.05). A atividade de duas enzimas no sangue sugere-se de um subconsumo, Cu e Zn. A atividade da enzima no plasma sangüíneo não foi reflectiu na capacidade de defesa enzimática antioxidante do plasma seminal, o que sugere a presença de isoenzimas não determinadas ou compartimentos separados entre o plasma sanguíneo e plasma seminal.